豆科植物原卟啉 Ⅸ（Proto Ⅸ）酶联免疫分析

验证范围： 96T

1.2 ng/L -50 ng/L

常用目地：

本还原剂盒用于测真菌秘密组织，细胞及其它方面样本之中原苯基 Ⅸ（Proto Ⅸ）摄取。

测试原理

本还原剂盒应该用双HIV夹心法测头颅骨之中真菌原苯基 Ⅸ（Proto Ⅸ）水平。用纯化的真菌原苯基 Ⅸ（Proto Ⅸ）HIV大块薄壳板，制成固相HIV，往大块哌的薄壳之中左至右自组真菌原苯基 Ⅸ（Proto Ⅸ），于是又与HRP标的有的原苯基 Ⅸ（Proto Ⅸ）HIV建构，形成HIV-抗原-酵素标的HIV复合物，经过彻底干净后加羧酸TMB苯酚。TMB在HRP酵素的还原下转变成深蓝色，并在酸的作用下转变成再度的黄色。蓝色的深浅和样本之中的真菌原苯基 Ⅸ（Proto Ⅸ）呈正方面。用酵素标的仪在450nm可见光下测滴视星等（OD倍数），通过准则双曲线近似倍数样本之中真菌原苯基 Ⅸ（Proto Ⅸ）沸点。

还原剂盒组成

头颅骨立即

1．头颅骨采集后尽早来进行提取，提取按方面文献来进行，提取后应该即刻来进行测试。若无法正要来进行试验中，可将头颅骨摆放-20℃保存，但应该可能会长时间冻融

2．无法验证含NaN3的样本，因NaN3选择性辣根还原反应酵素的（HRP）活性。

操作者步骤

1. 准则品的挥发：本还原剂盒发放原倍准则品一支，软件可按照下列数学公式在小试管之中来进行挥发。

1. 加样：分别设印出中空（印出对照中空不加样本及酵素标的还原剂，其余各步操作者相同）、准则中空、待测样本中空。在酵素标的大块板上准则品正确地加样50μl，待测样本中空之中先加样本挥发水银40μl，然后于是又加待测样本10μl（样本再度挥发度为5倍）。加样将样本加于酵素标的板中空底部，适当不聚焦中空壁，轻轻翻转混匀。

2. 温育：用封板上皮细胞封板后置37℃温育30分钟。

3. 配水银：将30倍浓缩干净水银用蒸馏水30倍挥发后备用

4. 干净：不慎揭掉封板上皮细胞，弃去水银体，甩干，每中空加满干净水银，浸泡30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

5. 加酵素：每中空自组酵素标的还原剂50μl，印出中空除外。

6. 温育：操作者同3。

7. 干净：操作者同5。

8. 苯酚：每中空先自组苯酚剂A50μl，于是又自组苯酚剂B50μl，轻轻冲击混匀，37℃避光苯酚10分钟.

9. 暂时中止：每中空加暂时中止水银50μl，暂时中止反应该（此时深蓝色立转黄色）。

10. 测：以印出中空调零，450nm可见光以此类推探测各中空的滴视星等（OD倍数）。 测应该在加暂时中止水银后15分钟以内来进行。

注意事项

1．还原剂盒从麦芽糖环境之中取走应该在常温平衡15-30分钟后方可常用，酵素标的大块板开封后如未用放，板条应该密封贮存袋之中保存。

2．浓干净水银可能会有结晶析出，挥发时可在水浴之中混和助溶，干净时不影响结果。

3．各步加样均应该常用加样器，并经常校对其正确地性，以可能会试验中误差。一次加样时间毫无疑问压制在5分钟内，如头颅骨数量多，推荐常用排枪加样。

4． 特地每次测的同时花钱准则双曲线，毫无疑问花钱复中空。如头颅骨之中待测微粒摄取过高（样本OD倍数成比例准则品中空第一中空的OD倍数），特地先用样本挥发水银挥发一定倍数（n倍）后于是又测，近似倍数时特地之后相乘总挥发倍数（×n×5）。

5． 封板上皮细胞只限一次性常用，以可能会交叉废料。

6．羧酸特地避光保存。

7．严格按照附上的操作者来进行，试验中结果判定能够以酵素标的仪测出大致相同.

8．所有样本，干净水银和各种废弃物都应该按传染物处理。

9．本还原剂不同批号组分不得混用。

保存先决条件及限期

1．还原剂盒保存：；2-8℃。

2．限期：6个月